Naar verluidt gebouwd waar Saint Ambrose zou zijn gebleven toen in Florence in 393, de kerk voor het eerst wordt opgenomen in 998. Het eerste gebouw wordt verondersteld dat dateren uit de 8e eeuw, als een kapel van een klooster die ter ere van de heilige is gebouwd.Francesco Granacci (1469–1543), een Italiaanse schilder van de Renaissance en levenslange vriend van Michelangelo Buonarroti, is begraven in deze kerk.The church contains numerous frescos, altarpieces, and other artwork attributed to Andrea Orcagna, Agnolo Gaddi, Niccolò Gerini, Lorenzo di Bicci, Masaccio, Filippo Lippi, Sandro Botticelli, Alesso Baldovinetti, Mino da Fiesole, Cosimo Rosselli, Fra Bartolomeo, and many otherkunstenaars.De incoronatie van Filippo Lippi van de Maagd, geëxecuteerd voor het belangrijkste altaar van de kerk in 1441-1447, is nu bij de Uffizi.